發(fā)酵罐滅菌操作說明

   罐內(nèi)的溫度逐漸上升，至所設(shè)置90°溫度時，攪拌電機停止轉(zhuǎn)動，此時打開罐體總進氣閥，打開罐體出氣管閥，依次打開以下閥門：打開出氣調(diào)節(jié)閥，緩慢打開罐 體進蒸汽閥對罐內(nèi)通入蒸汽，空氣濾器表壓開始上升，超過0.1MP時打開冷凝水閥門疏水，繼續(xù)開大罐體進蒸汽閥，除盡罐內(nèi)空氣后，罐內(nèi)壓緩慢上升，調(diào)整出 氣調(diào)節(jié)閥，使之達到滅菌所要求溫度壓力，達到滅菌溫度時計時開始。物料從頂部加料孔進入，然后進行蒸煮、滅菌，物料降溫通過內(nèi)蛇管、外夾套冷卻，罐底進入無菌空氣，從罐頂排出，達到通氣、恒溫要求，采用軸向攪拌翻料，發(fā)酵罐容積范圍為0。

    調(diào)整夾套進氣閥、罐體進蒸汽閥和出氣調(diào)節(jié)閥，使溫度、罐壓保持所設(shè)溫度。橡木桶發(fā)酵在歐洲葡萄酒發(fā)達國家有廣泛的應(yīng)用，而在中國甚少，橡木桶具有良好的通透性，有利于酵母的繁殖，促進發(fā)酵進程。滅菌時間到后，依次關(guān)閉已開的各進汽閥門，關(guān)閉蒸汽總閥門，完全放開罐內(nèi)尾氣排氣 閥放掉罐內(nèi)壓力，關(guān)閉蒸汽發(fā)生器電源。打開空氣壓縮機，等罐壓降至0.05MP時，緩慢打開進氣調(diào)節(jié)閥，維持罐內(nèi)正壓。

    滅菌過程中，操作員應(yīng)穿長衣長褲，帶防護手套，防止燙1傷。滅菌過程中如果蒸汽發(fā)生器自動進水，蒸汽總壓將迅速下降，必要時可以適當開大蒸汽總閥門，保持壓 力，但要小心觀察壓力變化。如果過濾阻力太大或失去過濾能力致影響正常生產(chǎn)，則需清洗或更換（建議直接更換，不作清洗，因清洗操作后不能可靠保證過濾器的性能）。對罐內(nèi)通蒸汽時，滅菌后罐壓下降較快，注意通無菌空氣時機。盡量不要使空氣壓縮機和蒸汽發(fā)生器同時工作。滅菌過程中空氣濾器壓 力不應(yīng)超過0.2MP。冷凝水的大小將影響罐內(nèi)液體滅菌后濃度，要考慮蒸汽冷凝水增加量。

發(fā)酵罐接種前的準備工作：

一，準備工具：

1，把長勢良好的搖瓶，菌球數(shù)量80-90%方可使用，75%的酒精棉

2，酒精噴壺，加入75%的酒精。

3，攝子，棉花，95%酒精，火機或火柴，水盆加入半盆清水，棉線手套兩，開接種口蓋所需要的撬棍鉗子之類的用具。根據(jù)操作方便而準備不同用具。

4，將上述用品，，先所有使用工具用75%酒精棉擦拭消毒處理。

接種流程

1，接種人員以緩沖間更換工作服，戴好防塵帽，口罩進入已經(jīng)做好消毒處理的液體發(fā)酵培養(yǎng)室，先用75%的酒精噴壺對空間進行噴霧降塵消毒處理。

2，將棉花搓成長33厘米直徑1厘米粗的棉繩（根據(jù)接種口周長而定棉繩長度），用95%酒精浸泡濕透，再將棉繩纏繞至接種口周圍，要求纏緊，系勞，不要纏在接種口封蓋上。纏好棉繩以后點燃棉繩，使接種口周圍形成一個酒精火焰保護圈。

3，帶好雙層棉線手套，放到?jīng)鏊畠?nèi)沾濕手套，然后將發(fā)酵罐排氣閥開大，當罐內(nèi)壓力降到到接近0時迅速用撬棍或鉗子將接種口封蓋打開，另一只手關(guān)閉發(fā)酵罐排氣閥，使罐內(nèi)壓力從接種口排出，使罐內(nèi)形成正壓，以避免接種環(huán)節(jié)帶入雜菌。

處理5秒左右蓋沿接種口，旋緊封蓋，同時將排氣閥微啟到發(fā)酵罐壓力保持在0·03即可。

發(fā)酵罐液體制作的誤區(qū)

發(fā)酵罐液體制作需要發(fā)酵罐本身質(zhì)量過硬，又需要操作者具有扎實的食用菌基本功，更重要的是不能陷入發(fā)酵罐液體制作的幾個誤區(qū)。

誤區(qū)一：接種量越大越好

很多人認為發(fā)酵罐的接種量越大越好，可是嘗試過加大接種量卻沒有得到想要的效果，難道加大接種量讓液體長得更快的想法不對嗎？

關(guān)于發(fā)酵罐接種量應(yīng)該這樣說，在能保證純度，和多次接種安全的情況下，可以加大接種量，即使如此，接種量也不是越大越好，根據(jù)菇行天下多年的經(jīng)驗，發(fā)酵罐的接種量不宜超過5%。

為什么呢？首先我們看大多數(shù)人加大接種量的手段，就是原來接種一個搖瓶，改為接種多個搖瓶，我們接種一個搖瓶，在不考慮搖瓶本身純度的前提下，接種環(huán)節(jié)導(dǎo)致發(fā)酵罐染菌的幾率為10%，那么，接種3個搖瓶的染菌幾率就是30%，是原來一瓶的3倍。如果考慮搖瓶本身的純度，染菌幾率就是原來的6倍。實驗表明，在發(fā)酵基質(zhì)中添加5%正十二烷，可明顯地提高發(fā)酵介質(zhì)中的溶氧水平，改善供氧條件，維持溶氧的相對穩(wěn)定，增加菌體濃度，提高L-天冬酞胺酶發(fā)酵水平(21%左右)。

很多人會采取合拼搖瓶的方法，就是將多個搖瓶在無菌條件下合拼在一個大三角瓶里，也叫做拼瓶，拼瓶是危險的，千萬不要嘗試！即使是在超凈工作臺里拼瓶，也很危險，更不要說在接種箱里了。因為：多個搖瓶的合拼就是多次接種的過程，一旦環(huán)境不合格或者操作不當，或者其中一個搖瓶帶有雜菌，那么后果顯而易見。反應(yīng)器的結(jié)構(gòu)指反應(yīng)器的類型、反應(yīng)器各部分尺寸的比例、空氣分布器的形式等。

因此，不要試圖通過加大接種量的方法解決發(fā)酵罐染菌的問題，你要做的是保證一瓶搖瓶的活性和純度，還有一次發(fā)酵罐接種環(huán)節(jié)的絕1對安全，那么你就成功了50%。

誤區(qū)二：通氣量越大越好

很多人為了讓發(fā)酵罐的菌球更小、更均勻，而提高了發(fā)酵罐的進氣量，目的是通過提高進氣壓力，增強發(fā)酵罐內(nèi)部的攪拌效果，已達到使菌球變小的目的。這樣不僅不能讓菌球變小，反而會增加染菌的幾率。