武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術(shù)服務(wù)企業(yè)。公司坐落于武漢光谷，由3位歸國博士創(chuàng)辦。公司長(zhǎng)期致力于建立并完善多項(xiàng)基礎(chǔ)生物技術(shù)服務(wù)平臺(tái)?，F(xiàn)憑借自身技術(shù)特色，依托光谷生物城技術(shù)產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢(shì)，面向全國提供的生物技術(shù)服務(wù)。


原位雜交：在研究DNA分子原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種技術(shù)。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點(diǎn)，應(yīng)用帶有標(biāo)記的（有性同位素，如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質(zhì)）DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測(cè)核酸（RNA或DNA）片段進(jìn)行雜交，然后可用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位；用原位雜交技術(shù)，可在原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。此方法有很高的敏感性和特異性，可進(jìn)一步從分子水平來探討細(xì)胞的功能表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。已成為當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。③雜交蛋白間穩(wěn)定度可被結(jié)構(gòu)域和結(jié)合結(jié)構(gòu)域結(jié)合形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物而增強(qiáng)，后者又與啟動(dòng)子DNA結(jié)合，此三元復(fù)合體使其中各組分的結(jié)合趨于穩(wěn)定。

（簡(jiǎn)稱原位雜交，in situ hybridization histochemistry；結(jié)果FISH技術(shù)證實(shí)了G顯帶平衡易位的結(jié)果，同時(shí)明確了3例羊水中衍生染色體的組成、2例臍血中標(biāo)記染色體的來源。ISHH）屬于分子雜交的一種，是一種應(yīng)用標(biāo)記探針與組織細(xì)胞中的待測(cè)核酸雜交，再應(yīng)用標(biāo)記物相關(guān)的檢測(cè)系統(tǒng)，在核酸原有的位置將其顯示出來的一種檢測(cè)技術(shù)。原位雜交的本質(zhì)就是在一定的溫度和離子濃度下，使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補(bǔ)規(guī)則與組織細(xì)胞內(nèi)待測(cè)的核酸復(fù)性結(jié)合而使得組織細(xì)胞中的特異性核酸得到定位，并通過探針上所標(biāo)記的檢測(cè)系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。

良好的前期標(biāo)本制備十分重要，這點(diǎn)對(duì)于采用秋水仙素刺激得到中期染色體分裂象尤為重要。刺激時(shí)間過短或過長(zhǎng)都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)觀察，因此需要耐心摸索作用時(shí)間。

蛋白酶K的作用濃度。濃度高了極易影響細(xì)胞核形態(tài)，造成模糊不清，濃度低了則探針不易進(jìn)入細(xì)胞核，雜交率大大降低。石蠟切片一般要達(dá)到10-30min，不要超過半小時(shí)，一般來說，20g/L蛋白酶K在50℃下消化20min足矣。

武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術(shù)服務(wù)企業(yè)。公司坐落于武漢光谷，由3位歸國博士創(chuàng)辦。公司長(zhǎng)期致力于建立并完善多項(xiàng)基礎(chǔ)生物技術(shù)服務(wù)平臺(tái)?，F(xiàn)憑借自身技術(shù)特色，依托光谷生物城技術(shù)產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢(shì)，面向全國提供的生物技術(shù)服務(wù)。對(duì)分散在若干個(gè)瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100-200）進(jìn)行篩選時(shí)，可采用該方法。

封片后標(biāo)本要盡快檢測(cè)和觀察。每一次熒光顯微鏡的觀察都會(huì)淬滅一部分信號(hào)，因此一定要快速觀察和采集圖像。有條件的話，小編推薦大家盡量選用共聚焦顯微鏡采集圖像，熒光顯微鏡備選。