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發(fā)布時(shí)間:2021-09-06 01:04  
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進(jìn)樣器的維護(hù)給樣機(jī)可分為手動(dòng)和自動(dòng)兩種,盡管它們的工作方式不同,但其使用要點(diǎn)基本相同。自動(dòng)進(jìn)樣器常見的問題是交叉污染,造成交叉污染的原因非常直接,樣品在進(jìn)樣針的內(nèi)外表面都?xì)埩糁鴺悠罚缓笤龠M(jìn)入色譜系統(tǒng)。要解決交叉污染,主要靠清潔。2、操作精細(xì),手動(dòng)進(jìn)樣器的操作要領(lǐng)大致相同,應(yīng)使用液相色譜 LC進(jìn)樣針,進(jìn)樣時(shí)要插到針頭,不使用時(shí)要將針頭留在進(jìn)樣器內(nèi),在使用前后要及時(shí)清洗。
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色譜柱維護(hù)化合物分離的關(guān)鍵是色譜柱。維護(hù)好的色譜柱具有很高的塔板數(shù)量,儀器基線穩(wěn)定。1、避免壓力、溫度急劇變化和機(jī)械振動(dòng)。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下,都會(huì)影響柱內(nèi)填充狀態(tài);柱壓突然升高或降低,也會(huì)對柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力,所以在調(diào)節(jié)流速時(shí)要緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩(如前面所述)。2、溶劑的組成應(yīng)逐漸改變,尤其是反相色譜,不能直接由改為全水,反之亦然。3、色譜柱反沖,納譜分析小分子分離液相色譜柱 ChromCore系列和 EcoPak系列色譜柱進(jìn)行反沖;納譜分析的手性色譜柱 UniChiral系列色譜柱可以反沖、反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。而納譜分析生物大分子液相色譜柱 BioCore系列色譜柱不能反沖,否則反沖會(huì)迅速降低柱效。4、為避免破壞固定相,選擇合適的流動(dòng)相(特別是 pH)。有時(shí)候,一預(yù)柱可以在進(jìn)樣器前連接,分析柱是硅膠粘合時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱前先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。
泵用后不能及時(shí)清洗移動(dòng)相中不得含有腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動(dòng)相不能留在泵中,特別是當(dāng)泵停泵過夜或更久時(shí)。若含有緩沖液的流動(dòng)相留在泵中,可能會(huì)析出鹽的微晶,如上述固體顆粒那樣損壞密封環(huán)和柱塞,甚至只是因?yàn)槿芤禾幱陟o止?fàn)顟B(tài)時(shí),會(huì)析出。所以,必須用純水將泵完全清洗干凈,然后轉(zhuǎn)換成適合于保存色譜柱和有利于泵維護(hù)的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可能是或-水)流相去空水泵工作時(shí)要注意防止溶劑瓶內(nèi)的流動(dòng)相被用完,否則泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞、氣缸或密封環(huán),終造成泄漏。如果沒有流動(dòng)相的外流,沒有壓力指示怎么辦?也許是泵內(nèi)有大量的氣體,此時(shí)可開啟泄壓閥,使泵在較大流量(如5 ml/min)下運(yùn)轉(zhuǎn),排出氣泡,也可用一個(gè)50 ml的針筒在泵出口協(xié)助抽氣。另外一個(gè)可能的原因是密封環(huán)磨損需要更換。
不穩(wěn)定的壓力和流量其原因可能是需要排除的氣泡;或單向閥內(nèi)有異物,可卸下單向閥,浸入內(nèi)超聲清洗。有時(shí)候可以是砂濾棒內(nèi)部出現(xiàn)氣泡,或者被細(xì)小鹽?;蜃躺⑸锊糠侄氯?,此時(shí),可卸下砂濾棒浸入流動(dòng)相超聲除氣泡,或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸(如4 mol/L)中迅速除去微生物,或?qū)Ⅺ}溶解,再立即清洗。為什么壓力太大還是太低?也許是管道堵塞了,需要清理清理。另一種可能是由于管道出現(xiàn)了泄漏。檢驗(yàn)阻塞或泄漏時(shí),應(yīng)逐段進(jìn)行。采用梯度洗脫時(shí),由于多種溶劑混和,組分不斷變化,產(chǎn)生了一些特殊問題,必須引起足夠的重視。PS:(在液相色譜中對成分復(fù)雜的樣品,采用梯度洗脫法。在同一分析周期內(nèi),不停地改變流動(dòng)相的濃度比例,稱為梯度洗脫。這樣,在一個(gè)復(fù)雜樣品中,性質(zhì)差異較大的組分,就能達(dá)到各自合適的容量因子 k的分離效果。
用不同的方法對色譜柱會(huì)有不同的要求,但是每一種色譜柱都有其清潔要求,這在色譜柱上可以找到,必須按照以上的要求來進(jìn)行,否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱效下降,色譜柱的使用壽命縮短,檢測波長會(huì)因品種的不同而有不同的要求,這里需要指出的是要注意觀察檢測器燈能量的變化,如基線波動(dòng)大,活性成分的響應(yīng)值突然變小等,對檢測器電鏡能量的變化,要注意觀察到檢測器中能量的變化,如基線波動(dòng)大,活性成分的響應(yīng)值突然變小等,有可能是由于燈的能量不足導(dǎo)致的,所以實(shí)際使用時(shí)要根據(jù)實(shí)際情況更換。流動(dòng)速度也因品種而異,一般為1.0 ml/min,流速不能隨意改變,尤其作為 QC人員,但作為研發(fā)人員,有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗(yàn)證,會(huì)改變流速來評估該方法的適用性。對不同品種的進(jìn)樣量也有不同的規(guī)定,進(jìn)樣量這個(gè)現(xiàn)在都是自動(dòng)進(jìn)樣,所以進(jìn)樣精密度都是很好的,不用特別強(qiáng)調(diào)。
操作員:,作為液相操作人員,必須認(rèn)真學(xué)習(xí)夜想說明書,掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常維護(hù),掌握基本故障的排除與維修。普通液相的操作規(guī)程也是由操作人員起草的,因此只要嚴(yán)格按照操作要求操作,一般都不會(huì)出現(xiàn)問題,當(dāng)然對液相的日常維護(hù)維護(hù)來說,特別是對液相的日常維護(hù)保養(yǎng)來說,要注意的是液相的日常維護(hù)保養(yǎng),泵密封墊的清洗、系統(tǒng)的清洗、溶劑過濾頭的清洗等方面都不會(huì)出現(xiàn)問題,尤其是對液相的日常維護(hù),不會(huì)造成不必要的麻煩。第二,操作者在配制液相分析樣品時(shí),好由同一人單獨(dú)完成,以免不必要的意外誤差。4、液體安裝環(huán)境:儀表應(yīng)盡量安裝在水平位置,遠(yuǎn)離振動(dòng)、電磁干擾的屋內(nèi),有條件時(shí)盡量把液相數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)分開,一方面是防止色譜基線噪聲太大、基線不穩(wěn)等,一方面是為了減少對人體的危害。