為什么細(xì)菌染色液常用堿性染料？什么情況用酸性染料？ 微生物染色的基本原理，是憑借物理要素和化學(xué)要素的效果而進(jìn)行的。物理要素如細(xì)胞及細(xì)胞物質(zhì)對(duì)染料的毛細(xì)現(xiàn)象、浸透、吸附效果等?；瘜W(xué)要素則是依據(jù)細(xì)胞物質(zhì)和染料的不一樣性質(zhì)而發(fā)作地各種化學(xué)反應(yīng)。酸性物質(zhì)關(guān)于堿性染料較易吸附，且吸附效果安定；相同，堿性物質(zhì)對(duì)酸性染料較易于吸附。如酸性物質(zhì)細(xì)胞核關(guān)于堿性染料就有化學(xué)親和力，易于吸附?？墒?，要使酸性物質(zhì)染上酸性資料，有必要把它們的物理方式加以改動(dòng)（如改動(dòng)pH值），才利于吸附效果的發(fā)作。 相反，堿性物質(zhì)（如細(xì)胞質(zhì)）一般僅能染上酸性染料，若把它們變?yōu)檫m合的物理方式，也相同能與堿性染料發(fā)作吸附效果。細(xì)菌的等電點(diǎn)較低，pH值大約在2—5之間，故在中性、堿性或弱酸性溶液中，菌體蛋白質(zhì)電離后帶陰電荷；而堿性染料電離時(shí)染料離子帶陽電。因而，帶陰電的細(xì)菌常和帶陽電的堿性染料進(jìn)行聯(lián)系。所以，在細(xì)菌學(xué)上常用堿性染料進(jìn)行染色。

巴氏染色液【主要組成成分】每盒巴氏染色液由蘇0木素染液（A液）、橘黃G染液（B液)和EA50染液（C液）各1瓶組成。A液成分：蘇0木0精；B液成分：橘黃G；C液成分：伊紅、亮綠。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

1、有效期：未開封試劑有效期為24個(gè)月，其中EA50染液（C液)使用時(shí)間為啟用后5個(gè)月內(nèi)。

2、儲(chǔ)存條件：本試劑盒應(yīng)貯存于相對(duì)濕度不大于80％，無腐蝕性氣體和通風(fēng)良好的常溫（10℃～30℃）環(huán)境。

3、生產(chǎn)日期和失效日期：詳見外包裝標(biāo)簽。

【樣本要求】新鮮標(biāo)本離開人體涂片后，需盡快以95%酒精固定，以避免細(xì)胞變形。

巴氏染色液【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】脫落細(xì)胞染色后，細(xì)胞核呈紫色，非角質(zhì)化細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)呈藍(lán)色或淡綠色，角質(zhì)化細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色或橘紅色。粘液呈淡藍(lán)色或粉紅色。

【檢驗(yàn)方法的局限性】僅供形態(tài)學(xué)初檢觀察染色使用。

巴氏染色液【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1、外觀：密封性良好，無漏液。

2、染色效果：脫落細(xì)胞染色后，細(xì)胞核呈紫色，細(xì)胞質(zhì)因分化成度不同，被染后呈現(xiàn)藍(lán)色、淡綠色、粉紅色或橘紅色。粘液呈淡藍(lán)色或粉紅色。

3、穩(wěn)定性：試劑盒在37℃恒溫箱中連續(xù)放置7天以上，仍能保持外觀和染色效果。

DAB染色液的使用方法：　　

1.DAB顯色液配制　　10mMTris-HCl(pH7.6)9mL DAB(diaminobezidin3，3-胺) 0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,顯色時(shí)加入5-10mL30%H2O2混勻后立即使用?！　?

2.顯色　　準(zhǔn)備好含有待測蛋白的固相膜：包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗（或生物素）處理、辣根過氧化酶（HRP）標(biāo)記的二抗（或鏈霉親和素）處理、清洗等步驟?！　?

3.加入適量的DAB顯色液，鋪滿整個(gè)固相膜表面（可按比例增減）。　　

4.置于平式搖蕩儀上，在室溫下孵育2至5分鐘，避免光照（暗室操作），直至棕褐色沉淀出現(xiàn)?！　?

5.用鑷子夾起固相膜，放進(jìn)無離子水里清洗?！　?

6.空氣中晾干?！　?

7.拍照記錄。