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發(fā)布時間:2021-04-29 11:12  

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Stathmin蛋白是一個與細(xì)胞的增殖和分化密切相關(guān)的蛋白分子,在細(xì)胞內(nèi)多條信號通路中作為中間蛋白發(fā)揮作用。能抑制細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)微核形成,導(dǎo)致部分細(xì)胞,但的毒性作用機(jī)制不是很清楚。目前,國內(nèi)外對Stathmin蛋白的研究集中在脊椎動物,而無脊椎動物中有關(guān)Stathmin蛋白的研究則相對較少。本研究從家蠶蛹cDNA文庫中獲得一條家蠶Stathmin...


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通過比較不同侵染液濃度、侵染時間、取材部位、預(yù)處理等條件下的轉(zhuǎn)化效果,優(yōu)化了農(nóng)介導(dǎo)的洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化系統(tǒng),并且成功檢測到大蕉ASR蛋白(MpASR)與GFP的融合蛋白在洋蔥表皮細(xì)胞中的分布。


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洋蔥(Allium cepa L.)屬百合科蔥屬,是世界主栽蔬菜之一,也是我國主要的出口蔬菜之一。植物在漫長的進(jìn)化過程中發(fā)展出了一套適應(yīng)缺磷環(huán)境的形態(tài)變化及生理生化方面的機(jī)制,包括根系構(gòu)型的改變、酸性磷酸酶、RNA酶及有機(jī)酸的分泌、與叢枝菌根真菌(AMF,ArbuscularMycorrhizalFungi)形成共生體系等等。FT(FLOWERING LOCUS T)基因是開花植物光周期反應(yīng)過程中調(diào)控植物成花的關(guān)鍵基因,也是重要的開花整合因子。實(shí)驗(yàn)室在前期工作中已經(jīng)成功了洋蔥的開花素類似基因Ac FT1及Ac LFT,為確定其功能,本試驗(yàn)分別構(gòu)建了Ac FT1及Ac LFT的正義、反義和RNAi干擾的植物表達(dá)載體,通過凍融法導(dǎo)入到根癌農(nóng)EHA105中,進(jìn)而通過花序侵染法轉(zhuǎn)入模式植物擬南芥中。通過熒光定量PCR法測定Ac FT1及Ac LFT在擬南芥抽薹前葉片中的相對表達(dá)含量,觀察轉(zhuǎn)化植株的形態(tài)學(xué)指標(biāo),繼而確定Ac FT1及Ac LFT在洋蔥成花中的作用,為實(shí)現(xiàn)洋蔥抽薹開花的基因調(diào)控提供參考。試驗(yàn)結(jié)果歸納如下:⑴構(gòu)建了Ac FT1的正義植物表達(dá)載體p Z-Ac FT1,反義植物表達(dá)載體p R-AcFT1,RNAi植物表達(dá)載體p RNAi-Ac FT1;構(gòu)建了AcLFT的正義植物表達(dá)載體p Z-AcLFT,反義植物表達(dá)載體p R-Ac LFT,RNAi植物表達(dá)載體p RNAi-Ac LFT.;⑵利用凍融法將重組質(zhì)粒p Z-Ac FT1、p R-Ac FT1、p RNAi-Ac FT1、p Z-Ac LFT、p R-Ac LFT、p RNAi-Ac LFT導(dǎo)入根癌農(nóng)EHA105中,利用花序侵染法對擬南芥進(jìn)行轉(zhuǎn)化。