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發(fā)布時(shí)間:2021-03-21 21:31  

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親和柱的區(qū)別

北京中檢維康生物技術(shù)有限公司——專業(yè)親和柱供應(yīng)商,我們?yōu)槟鷰硪韵滦畔ⅰ?

1ml親和柱和3ml親和柱的區(qū)別很明顯就是兩者的柱體積不一樣。

當(dāng)然親和柱有很多的種類,比如鎳螯合柱,蛋白A柱等等。

假設(shè)是同一種填料的親和柱,那么1ml親和柱和3ml親和柱的區(qū)別就是,1ml柱里面裝載了1ml體積的填料,而3ml柱里面裝載了3ml的填料。

體積越大,能親和吸附的樣品就越多。



親和柱的應(yīng)用

應(yīng)用:牛奶中黃曲霉毒素M1的測(cè)定

(參考方法GB 541337-2010 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 乳和乳制品中黃曲霉毒素M1 的測(cè)定)

樣品前處理

稱取50g牛奶到具塞離心管中,在水浴中加熱到35-37℃,4000轉(zhuǎn)離心15min,除去上層乳脂,全部樣品待過柱凈化

樣品過柱凈化

1. 將親和柱(SBHL-20-0245)連接于10ml或50ml注射管下。

2. 將處理好的樣品全部通過親和柱,控制試樣以2mL/min-3mL/min穩(wěn)定的流速過柱。(注意:空氣不能通過柱體)

3. 以穩(wěn)定的流速淋洗柱子兩次,棄去全部流出液,并使2mL-3mL空氣通過柱體。

4. 洗脫,流速為1mL/min-2mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測(cè)用。



親和柱——特點(diǎn)介紹

親和柱,相對(duì)于多功能凈化柱特異性強(qiáng),靈敏度較高;多功能凈化柱就相對(duì)使用方便,無需洗脫,比較適合簡(jiǎn)單樣品的樣品純化。

親和柱主要特點(diǎn)如下:

? 符合真菌毒素檢測(cè)的國際標(biāo)準(zhǔn)
? 回收率>95%
? 可重復(fù)性(CV%):<5%
? 可以用于多種萃取溶劑
? 新能穩(wěn)定
? 可以用于復(fù)雜樣品檢測(cè),包括食品與飼料等多種基質(zhì)

? 可用于黃曲霉毒素,嘔吐毒素,付馬毒素,赭曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的檢測(cè)



親和柱——親和層析的應(yīng)用

抗原和抗體利用抗原、抗體之間高特異的親和力而進(jìn)行分離的方法又稱為親和層析。例如將抗原結(jié)合于親和層析基質(zhì)上,就可以從中分離其對(duì)應(yīng)的抗體。在蛋白質(zhì)工程菌發(fā)酵液中所需蛋白質(zhì)的濃度通常較低,用離子交換、凝膠過濾等方法都難于進(jìn)行分離,而親和層析則是一種非常有效的方法。將所需蛋白質(zhì)作為抗原,經(jīng)動(dòng)物后制備抗體,將抗體與適當(dāng)基質(zhì)偶聯(lián)形成親和吸附劑,就可以對(duì)發(fā)酵液中的所需蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化??乖⒖贵w間親和力一般比較強(qiáng),其解離常數(shù)為108-10?12M,所以洗脫時(shí)是比較困難的,通常需要較強(qiáng)烈的洗脫條件??梢圆扇∵m當(dāng)?shù)姆椒ㄈ绺淖兛乖?、抗體種類或使用類似物等來降低二者的親和力,以便于洗脫。

另外金黃色球菌蛋白A(ProteinA)能夠與球蛋白G(IgG)結(jié)合,可以用于分離各種IgG。



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