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洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng)電話「多圖」

發(fā)布時間:2021-04-09 17:31  

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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;構(gòu)建了植物表達(dá)載體pBRSAg,該載體具有完整的植物表達(dá)元件,CaMV35S啟動子、農(nóng)T-DNA左右邊界、植物報告基因gus和植物選擇標(biāo)記基因hpt,適用于農(nóng)的轉(zhuǎn)化。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。




分別用70%乙醇和滅菌蒸餾水清洗金粉(直徑為1 μm),加入滅菌蒸餾水制成金粉懸浮液,取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋蔥表皮的玻璃皿中,邊振蕩邊加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP質(zhì)粒,逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亞精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2,振蕩混勻?;驑孏DS-80轟擊時氦氣罐的氣壓為1 300 psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒懸浮液加到基因槍中央,進(jìn)行轟擊,之后放置25℃避光過夜培養(yǎng),使用ConfocalLaser激光共聚焦顯微鏡觀察。通過凍融法將重組質(zhì)粒pBRSAg轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)LBA4404中,利用農(nóng)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化葉盤,經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得植株。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。




甘蔗是的糖料作物,甘蔗黑穗病已成為世界性甘蔗主要病害,也是我國甘蔗栽培上嚴(yán)重的真菌病害,挖掘甘蔗自身抗病基因?qū)共∮N有重要意義。植物病程相關(guān)蛋白(Pathogenesis Related Proteins,PRP/PRs)是在某種病理或病理相關(guān)環(huán)境條件下,植物體內(nèi)受誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異蛋白質(zhì),其在植物抗病反應(yīng)中起重要作用,與植物系統(tǒng)獲得性抗性(systemic acquiredresistance,SAR)密切相關(guān)。β-1,3-葡聚糖酶屬于典型的PR2蛋白,可水解許多種真菌細(xì)胞壁的主要成分β-1,3-葡聚糖,在植物抵御真菌病原的防衛(wèi)反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。能抑制細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)微核形成,導(dǎo)致部分細(xì)胞,但的毒性作用機(jī)制不是很清楚。本研究在甘蔗響應(yīng)黑穗病菌侵染的表達(dá)譜分析的基礎(chǔ)上,選擇與防衛(wèi)蛋白相關(guān)的差異表達(dá)基因序列,利用電子,結(jié)合RT-PCR和基因?qū)嶒灱夹g(shù),以高抗黑穗病的甘蔗無性系Ya05-179為實驗材料,擴(kuò)增獲得甘蔗β-1,3-葡聚糖酶家族基因的2個成員,并命名為ScBG1和ScBG2。生物信息學(xué)分析顯示,ScBG1基因DNA序列全長1 175bp,編碼332個氨基酸,含有1個長度為156bp的內(nèi)含子;ScBG2基因DNA序列全長1 820bp,編碼392個氨基酸,含2個長度分別為156bp和973bp的內(nèi)含子;上述2個基因核酸序列的同源性為39.58%,均屬于糖基水解酶第十七家族。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;本文將對紫花苜蓿苜蓿皂甙合成途徑中關(guān)鍵酶基因進(jìn)行篩選、和功能分析,為苜蓿品質(zhì)改良及選育新品種提供新的理論依據(jù)。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。




植物細(xì)胞壁抗降解屏障是限制秸稈生物質(zhì)資源化轉(zhuǎn)化利用的關(guān)鍵因素,而木質(zhì)纖維素的阿魏酸化是禾本科植物細(xì)胞壁抗降解屏障形成的重要分子基礎(chǔ)。植物阿魏酰基轉(zhuǎn)移酶(Feruloyl transferase)是負(fù)責(zé)將阿魏酸從阿魏酰CoA轉(zhuǎn)移至阿拉伯木聚糖分子上的關(guān)鍵酶之一,在阿拉伯木聚糖與木質(zhì)素的連接上起到關(guān)鍵作用,與植物細(xì)胞壁抗降解屏障的形成關(guān)系十分密切,因此對阿魏?;D(zhuǎn)移酶基因開展研究將可以為禾本科能源植物開發(fā)利用以及農(nóng)作物秸稈的再生利用提供新的思路。本文對禾本科模式植物二穗短柄草(Brachypodium distachyon)中的一個可能的阿魏?;D(zhuǎn)移酶基因Bra1進(jìn)行研究,其主要研究結(jié)果如下:1.以二穗短柄草成熟莖組織mRNA為材料,采用RT-PCR技術(shù)得到了Bra1(5g14720)基因的全長cDNA序列,其序列大小為1369 bp,生物信息學(xué)分析表明該基因的開放閱讀框(ORF)編碼443個氨基酸殘基,其編碼蛋白質(zhì)的理論分子質(zhì)量為48.45 kDa。囚此本研究以剛毛檉柳(Tamarixhispida)的轉(zhuǎn)錄因子ThDREB和翻譯起始因子TheIFIA兩個基因為研究對象,對基因的表達(dá)和功能進(jìn)行了初步研究,以期為抗逆基因工程育種提供理論依據(jù)和基因材料。進(jìn)一步的基因原核表達(dá)以及蛋白質(zhì)譜分析也表明該基因的開放閱讀框能正確編碼一個BAHD?;D(zhuǎn)移酶蛋白,其分子量大小與理論值基本一致。2.Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD?;D(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域,說明Bra1基因是BAHD?;D(zhuǎn)移酶基因家族的一個成員。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;大豆花葉病毒病分布非常廣泛,是一種世界害,它嚴(yán)重影響大豆產(chǎn)量和外觀品質(zhì)。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。





以擬南芥金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體基因AtZIP1(GenBank登錄號:AAC24197)的氨基酸序列為信息探針,從水稻(Oryza sativa L.)中分離得到OsZIP7a和OsZIP8兩個鋅鐵轉(zhuǎn)運(yùn)體基因,OsZIP7a和OsZIP8分別編碼384和390個氨基酸殘基的產(chǎn)物。OsZIP7a和OsZIP8與ZIP家族成員有著高度的同源性,均包含8個跨膜區(qū),有著高度保守的ZIP結(jié)構(gòu),在第3和第4跨膜區(qū)之間存在一個可變區(qū),可變區(qū)富含組氨酸。半定量RT-PCR分析結(jié)果表明,OsZIP7a和OsZIP8在水稻根、莖、葉和幼穗等組織中均呈低水平表達(dá);在缺鐵處理時,OsZIP7a基因在水稻幼苗根部的表達(dá)量增多,而在地上部的表達(dá)未明顯增多;在缺鋅處理的水稻幼苗中,OsZIP8基因的表達(dá)量顯著增多。結(jié)論:紅樹Bet/ProT2基因能通過吸收甜菜堿和/或脯氨酸來降低氧化傷害,顯著提高轉(zhuǎn)基因水稻的耐鹽能力。構(gòu)建OsZIP7a::GFP瞬時表達(dá)載體,采用農(nóng)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞,結(jié)果表明,OsZIP7a::GFP定位于洋蔥表皮細(xì)胞的質(zhì)膜上。構(gòu)建酵母表達(dá)載體pFL61-OsZIP7a和pFL61-OsZIP8,利用醋酸鋰方法分別轉(zhuǎn)入酵母雙突變株fet3fet4DEY1453和zrt1zrt2ZHY3中,設(shè)pFL61空載體為陰性對照,分別在低鐵和低鋅的酵母YPD培養(yǎng)基中進(jìn)行酵母功能互補(bǔ)實驗。