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植物染色體原位雜交技術服務品牌企業(yè)「邁斯普」

發(fā)布時間:2021-08-21 09:14  

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武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學技術服務、技術咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術服務企業(yè)。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國博士創(chuàng)辦。公司長期致力于建立并完善多項基礎生物技術服務平臺?,F(xiàn)憑借自身技術特色,依托光谷生物城技術產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢,面向全國提供的生物技術服務。


原位雜交:在研究DNA分子原理的基礎上發(fā)展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應用帶有標記的(有性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內(nèi)待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交,然后可用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;用原位雜交技術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調(diào)節(jié)機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。③雜交蛋白間穩(wěn)定度可被結構域和結合結構域結合形成轉錄起始復合物而增強,后者又與啟動子DNA結合,此三元復合體使其中各組分的結合趨于穩(wěn)定。




(簡稱原位雜交,in situ hybridization histochemistry;結果FISH技術證實了G顯帶平衡易位的結果,同時明確了3例羊水中衍生染色體的組成、2例臍血中標記染色體的來源。ISHH)屬于分子雜交的一種,是一種應用標記探針與組織細胞中的待測核酸雜交,再應用標記物相關的檢測系統(tǒng),在核酸原有的位置將其顯示出來的一種檢測技術。原位雜交的本質就是在一定的溫度和離子濃度下,使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規(guī)則與組織細胞內(nèi)待測的核酸復性結合而使得組織細胞中的特異性核酸得到定位,并通過探針上所標記的檢測系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。




良好的前期標本制備十分重要,這點對于采用秋水仙素刺激得到中期染色體分裂象尤為重要。刺激時間過短或過長都會影響實驗觀察,因此需要耐心摸索作用時間。

蛋白酶K的作用濃度。濃度高了極易影響細胞核形態(tài),造成模糊不清,濃度低了則探針不易進入細胞核,雜交率大大降低。石蠟切片一般要達到10-30min,不要超過半小時,一般來說,20g/L蛋白酶K在50℃下消化20min足矣。


武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學技術服務、技術咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術服務企業(yè)。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國博士創(chuàng)辦。公司長期致力于建立并完善多項基礎生物技術服務平臺?,F(xiàn)憑借自身技術特色,依托光谷生物城技術產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢,面向全國提供的生物技術服務。對分散在若干個瓊脂平板上的少數(shù)菌落(100-200)進行篩選時,可采用該方法。


封片后標本要盡快檢測和觀察。每一次熒光顯微鏡的觀察都會淬滅一部分信號,因此一定要快速觀察和采集圖像。有條件的話,小編推薦大家盡量選用共聚焦顯微鏡采集圖像,熒光顯微鏡備選。