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發(fā)布時(shí)間:2021-04-20 09:12  
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微透析系統(tǒng)
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目前測定回收率的方法主要有以下幾種:1,外標(biāo)法計(jì)算被測物質(zhì)相對濃度的變化時(shí), 可簡單地采用體外回收率法。瑞典CMA是一家首創(chuàng)“微透析”技術(shù),并將微透析進(jìn)行商業(yè)化的高科技公司。測定宜在取樣后立即進(jìn)行, 將探針放入已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液中, 用與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)相同的流速灌流探針。達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)后收集灌流液并進(jìn)行檢測。測定濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度之比就是體外回收率。此法雖簡單易行, 但由于被測物質(zhì)在體外時(shí)與體內(nèi)的環(huán)境狀況不同, 檢測結(jié)果不能嚴(yán)格地等同于實(shí)際的回收率。2,內(nèi)標(biāo)法往灌流液中加入已知濃度且性質(zhì)與被分析物質(zhì)相似的另一種物質(zhì)做內(nèi)標(biāo),內(nèi)標(biāo)物不僅在擴(kuò)散性質(zhì)上與被分析物一致,而且還要在體內(nèi)的代謝過程中也盡可能一致,測出透析率即作為被分析物的回收率。由于選擇內(nèi)標(biāo)的局限性很大, 限制了此法的應(yīng)用。3,反透析法假設(shè)被測物從兩個(gè)方向通過半透膜是同等的。在灌流液中加入一定濃度的內(nèi)標(biāo)物(Cic) ,在與體內(nèi)透析相同的條件下操作, 測定透析液中內(nèi)標(biāo)物的濃度(Cec) ,體內(nèi)回收率(Rin ,vivo ) 可用下式計(jì)算:Rin vivo = (1 Cec/ Cic) ×100 %本法要求內(nèi)標(biāo)物具有生物惰性, 盡可能與被測物相似。
微透析系統(tǒng)應(yīng)用范疇
精神藥學(xué)、神經(jīng)的病理及癌研究、藥動(dòng)態(tài)學(xué)及毒物學(xué)、生理學(xué)藥理學(xué)、生命胺分析、乙酰膽素/膽分析、自由基/氨基酸分析、各種組織生化/藥分析。
目前CMA的研究團(tuán)隊(duì)已正式將微透析技術(shù)運(yùn)用于臨床上,包含重病患的監(jiān)護(hù),病患內(nèi)臟、移植,外在醫(yī)學(xué)等,對人類疾病的研究上,也有許多貢獻(xiàn)。
微透析系統(tǒng)的相關(guān)內(nèi)容
透析液收集器是將從探針中采集的樣本收集起來。該技術(shù)常與電化學(xué)檢測、熒光、測定等系統(tǒng)聯(lián)合,對離子、單胺類、氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)、能量物質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的濃度變化監(jiān)測。所用容器為PCR96孔板或500ul離心管(將離心管放在收集器的孔板上用來盛放收集的樣品)。為了保證樣本不會(huì)變質(zhì),在收集器中特設(shè)置了一個(gè)低溫調(diào)節(jié)裝置。低溫調(diào)節(jié)裝置和收集器是分體的,通過電纜線進(jìn)行連接,由收集器的控制面板進(jìn)行溫度控制。溫度控制范圍0-4℃。這樣就保證了樣品的新鮮而且不會(huì)變質(zhì)。采集速率5秒至99分鐘,1秒步進(jìn)。可同時(shí)采集1,2,4通道的透析液。
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CMA (全名CMA/MICRODIALYSIS AB)成立于1984年, 是一家以研究為導(dǎo)向的高科技公司。這套設(shè)備可對麻或清醒的動(dòng)物進(jìn)行連續(xù)的灌流實(shí)驗(yàn),為醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展提供了嶄新的技術(shù)。 總部設(shè)于瑞典斯德哥爾摩, 其創(chuàng)辦人為瑞典的KAROLINSKA學(xué)院藥理大師URBAN UNGERSTEDT,任諾貝爾獎(jiǎng)病理學(xué)醫(yī)學(xué)評委。 上世紀(jì)70年代初,西班牙Delgado及瑞典URBAN UNGERSTEDT等人首先提出了“微透析”的概念。微透析(Microdialysis)是一種從生物體內(nèi)進(jìn)行動(dòng)態(tài)微量生化取樣的新技術(shù), 可用于麻或清醒的生物上, 具有體連續(xù)取樣、動(dòng)態(tài)觀察、定量分析、采樣量小、組織損傷輕等特點(diǎn)。
