ELISA試劑盒——會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題及解決辦法

1. 加入反應(yīng)終止液后，沒(méi)有吸光值或吸光值偏低。

a.原因：未加入酶標(biāo)記物。

解決辦法：請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行。

b.原因：試劑盒內(nèi)容物未能充分回。

解決辦法：確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進(jìn)行操作。

c.原因：室溫太低。

解決辦法：若室溫太低(<19℃)，請(qǐng)于操作步驟4，適當(dāng)延長(zhǎng)溫育時(shí)間。

d.原因：未使用試劑盒的清洗液清洗。

解決辦法： 請(qǐng)用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。

e.原因：試劑盒已過(guò)有效期限。

解決辦法：請(qǐng)更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。

Elisa試劑盒的注意事項(xiàng)

Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅清中補(bǔ)體系統(tǒng)，在較少數(shù)情況下（培養(yǎng)ES細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞時(shí)）建議滅活，在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀，如必須滅活請(qǐng)按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基：無(wú)培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì)，但是，仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí)，常常會(huì)先使用有的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成培養(yǎng)液。

Elisa試劑盒的安全性

8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

2. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

3. 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

4. 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

5. 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。