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發(fā)布時間:2020-10-01 22:09  
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PCR實驗室布局
實驗室的氣流也應從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),不得逆向流動。各工作區(qū)頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。
PCR實驗室工作基本原則
工作結束后,必須立即對工作區(qū)進行清潔。工作區(qū)的實驗臺表面應當可耐受諸如化學物質的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應當方便有效。
實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),即從試劑準備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產物分析區(qū),不得逆向流動。
PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區(qū)
核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法、質譜分析等。
PCR實驗室又叫基因擴增實驗,PCR是聚合酶鏈式反應簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA,可看作生物體外的特殊DNA。通過DNA基因追系統(tǒng),能迅速掌握生物體內的病毒含量,其精準度高達納米級別。
PCR實驗室注意事項——標本制備區(qū)
由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,可通過在本區(qū)內設立正壓條件,避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。
為避免樣本間的交叉污染,加入待測核酸后,必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在危險性的材料,必須在生物安全柜內開蓋,并有明確的樣本處理和滅活程序。
PCR實驗室原則上為試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并設有專用走廊,各工作區(qū)域應設緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
PCR實驗室的設計原則
原則上應當設置4個區(qū)域:試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū)。根據使用儀器的功能,區(qū)域可適當合并。
PCR實驗室注意事項
試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)設緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,可以根據用戶的使用情況和資金的投入選擇。
PCR實驗室各區(qū)功能及主要設備
樣品制備區(qū):主要進行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區(qū)主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。