水中糞大腸菌群的常見檢測方法

1、紙片法

采用紙片、紙膜、膠片等作為培養(yǎng)基載體，將特定的培養(yǎng)基和顯色物質(zhì)附著在上面，通過糞大腸菌群在上面的生長、顯色來測定的方法，即糞大腸菌在紙片培養(yǎng)基上呈紅色菌落，菌落周圍產(chǎn)生黃圈是糞大腸菌分解乳糖產(chǎn)酸使指示劑變色的結(jié)果。

2、酶底物法

將加入酶底物檢測試劑的100ml水樣注入51孔或97孔的定量測量盤中進(jìn)行密封后培養(yǎng)，由于大腸菌群細(xì)菌能產(chǎn)生一種β-半乳糖苷酶分解PG使得培養(yǎng)液呈黃色，同時(shí)大腸埃希氏菌可以產(chǎn)生葡萄糖醛酸酶分解MUG，培養(yǎng)液將會(huì)在波長366nm紫外光下產(chǎn)生熒光反應(yīng)。通過計(jì)算有黃色反應(yīng)和熒光反應(yīng)的孔穴數(shù)，可對(duì)照MPN表查出其代表的糞大腸菌群可能數(shù)水中糞大腸菌群。

大腸菌群是指在37℃培養(yǎng)24h內(nèi)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，產(chǎn)氣的兼性厭氧的革藍(lán)氏陰性無芽孢桿菌的總稱。主要由腸桿菌科中四個(gè)屬內(nèi)的細(xì)菌組成，即埃希氏桿菌屬，檸檬酸桿菌屬，克雷伯氏菌屬和腸桿菌屬。

  水中大腸菌群的檢測方法，常用多管發(fā)酵法和濾膜法。多管發(fā)酵法可適用于各種水樣的檢驗(yàn)，但操作繁瑣，需要的時(shí)間較長。濾膜法僅適用于自來水和深井水，操作簡單、快速，但不適用于雜質(zhì)較多易于堵塞濾孔的水樣。

酶底物法封膜機(jī)安裝校準(zhǔn)

①開啟紙板箱，有包裝，以便后再用。

②把設(shè)備放于一個(gè)開闊的室內(nèi)空間，前后要有橡膠墊和定量分析盤進(jìn)出室內(nèi)空間。

③把電源線插頭插進(jìn)設(shè)備側(cè)面開關(guān)電源的插口，隨后在插進(jìn)電源插座，開啟全自動(dòng)封口機(jī)按鍵開關(guān)，這時(shí)全自動(dòng)封口機(jī)剛開始系統(tǒng)自檢升溫，大概等候3分鐘，顯示器顯示“SEA”字眼，全自動(dòng)封口機(jī)就進(jìn)到常規(guī)工作情況。

1、根據(jù)酶底物法封膜機(jī)自動(dòng)將水樣分派到51孔或是97孔定量分析盤孔中封膜成單獨(dú)的孔。

2、培養(yǎng)24小時(shí)結(jié)束后，陽性孔數(shù)能夠轉(zhuǎn)化為MPN值，能夠直接讀出數(shù)值。

3、51孔定量分析盤可監(jiān)測每100mL水樣中1-200MPN值。

4、97孔定量分析盤可監(jiān)測每100mL水樣中1-2,419MPN值。

5、全部監(jiān)測流程手工制作時(shí)長低于1分鐘。

食品大腸桿菌菌群檢測--MPN計(jì)數(shù)法

MPN（most probable number）法：即Z近似數(shù)法，也稱為Z可能數(shù)法，是食品檢驗(yàn)中常用的方法。1915年，McCrady第yi次發(fā)表了用MPN法 (Z大可能數(shù)法) 來估算細(xì)菌濃度的方法， 這是一種應(yīng)用概率理論來估算細(xì)菌濃度的方法。

MPN法：利用待測微生物的特殊生理功能的選擇性來擺脫其他微生物類群的干擾，并通過該生理功能的表現(xiàn)來判斷該類群微生物的存在和豐度。因?yàn)榧?xì)菌在樣本內(nèi)的分布是隨機(jī)的，所以檢測細(xì)菌時(shí)，可應(yīng)用概率理論計(jì)算菌數(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以MPN值表示，但MPN值并不能表示實(shí)際菌落數(shù)， 實(shí)際菌落數(shù)有可能落在置信區(qū)間內(nèi)的任何一點(diǎn)，MPN值是落在這個(gè)置信區(qū)間內(nèi)概率Z大的一點(diǎn)。